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目的 研究双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响，以探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法 采用双电极电压钳技术，观察双苯氟嗪对表达于非洲爪蟾卵母细胞上的KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响。结果 双苯氟嗪（0.3～30 μmol·L-1）浓度依赖性地抑制KCNQ1/KCNE1电流，IC50为(8.9±1.8)μmol·L-1。在-10～90 mV范围内双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1电...
应用PCR技术对先天性长QT综合征KCNQ1基因进行定点突变的研究PCR Site-Directed Mutagenesis of Long QT Syndrome KCNQ1 Gene in vitro
长QT综合征 KCNQ1 PCR 定点突变
2008/1/20
摘要
利用聚合酶链反应（PCR）技术对长QT综合征（LQTS）KCNQ1基因进行定点突变的研究。首先设计两对引物（包含预定的突变），通过3轮PCR扩增，扩增出含有所需突变位点的片段，然后将片段克隆入T载体中，通过酶切连接的方法将突变点引入到pIRES2-EGFP-KCNQ1中，随后用Effectene转染试剂介导转染HEK293细胞。结果在真核表达载体pIRES2-EGFP-KCNQ1基础上获得...