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2021年2月18日,《自然》杂志在线发表了清华大学医学院基础医学系祁海教授课题组题为Affinity-coupled CCL22 promotes positive selection in germinal centres(《亲和力耦联的CCL22促进生发中心正向筛选》)的研究论文(原文:https://www.nature.com/articles/s41586-021-03239-2)。该...
全细胞差减筛选法筛选与人卵巢癌细胞特异性结合的短肽
全细胞差减筛选法 人卵巢癌细胞 特异性结合 短肽
2013/9/4
全细胞差减法筛选人源性卵巢癌HO8910细胞株特异性结合短肽, 为卵巢癌的靶向药物治疗提供理想的载体。方法 以人卵巢癌HO8910细胞为靶细胞, 人正常卵巢上皮细胞为吸附细胞, 对噬菌体随机环7肽库进行4轮差减筛选; ELISA验证阳性噬菌体克隆; 对获得的阳性克隆进行DNA测序及生物信息学分析, 采用免疫荧光细胞化学方法鉴定噬菌体阳性克隆(phage1)与HO8910细胞的特异性结合。结果 经过...
田鼠巴贝虫cDNA文库构建与免疫筛选
田鼠巴贝虫 cDNA文库 免疫筛选
2013/11/21
目的 构建田鼠巴贝虫cDNA文库,从中筛选免疫诊断候选抗原。 方法 用田鼠巴贝虫感染BALB/c小鼠,约7 d后待虫血密度达到70%时取血,提取虫体总RNA,经mRNA 纯化试剂盒纯化后,构建田鼠巴贝虫的cDNA文库。用田鼠巴贝虫感染阳性小鼠血清筛选cDNA文库,获得阳性克隆,PCR鉴定阳性克隆插入片段大小,测序并进行同源性分析。 结果 所构建的田鼠巴贝虫cDNA文库的滴度为5.2 × 105噬菌...
目的: 用SEREX方法鉴定HCC表达的肿瘤抗原, 检测hcct-19的表达谱. 方法: 将HCC表达文库铺板, IPTG诱导蛋白质表达, BSA封闭. 同1∶1 000稀释的预吸收HCC患者血清反应后, 与1∶5 000稀释的羊抗人抗体反应, 在BCIP/NBT的作用下显色, 挑取阳性克隆噬菌斑块, 重复筛选和铺板3次, 直至得到一致的单克隆免疫阳性重组噬菌体. 挑取阳性克隆噬菌斑, 用载体克隆...
神经生长因子介导的促神经生长化合物筛选系统的建立
化合物筛选 神经再生 神经生长因子 图象分析
2008/7/1
为了合理评价化合物的促神经再生活性.用溴化四唑蓝(MTT)、分化计数、图象处理等方法,借助FK506、GPI1046阳性化合物,建立了一个基于PC12细胞存活和分化的化合物筛选系统.结果表明,无论在细胞存活实验还是在分化实验中,FK506、GPI1046都可以明显增强神经生长因子(NGF)的效应,即有促神经再生的作用.也就是说,这一系统将有助于从组合化学方法合成的化合物文库中,筛选出具有...
人源性抗核抗体Fab片段的筛选及鉴定
抗核抗体 单克隆抗体 噬菌体展示肽库 筛选
2008/5/14
目的:制备人源性抗核抗体Fab片段。方法:通过4轮淘筛,富集已构建的人源性抗核抗体Fab片段噬菌体抗体库,间接ELISA法鉴定4轮淘筛后抗核抗体Fab片段噬菌体抗体;提取阳性克隆的噬菌粒DNA,切除gⅢ基因片段,自连接后转化大肠杆菌XL1-Blue,以IPTG诱导表达可溶性人源性抗核抗体Fab片段;应用间接ELISA法及荧光免疫法对表达上清进行鉴定。结果:第4轮洗脱的噬菌体滴度较第1...
可结合细胞表面IL-2Rα的短肽分子的筛选
2007/7/25
已知IL-2是T淋巴细胞自分泌的细胞因子,对于维持活化的T细胞增殖、促进NK、CTL细胞的杀伤以及B细胞的增殖、活化巨噬细胞均有重要作用。IL-2主要通过与表达在细胞膜表面的高亲和力受体相互结合后发挥其生物学活性。IL-2R是由α、β和γ链组成,静止的T细胞表面仅表达中等亲和力的IL-2R(IL-2Rβγ),当T细胞活化时,才表达IL-2R α链,即α链与β和γ链以非共价键形式结合,所形成的三聚体...