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欧洲中部刺槐种源群体的等位酶变异研究
等位酶 遗传多样性 刺槐 种源群体
2008/1/26
摘要 从欧洲中部及美国收集了18个刺槐种源种子,以2年生苗木为材料,采用水平切片淀粉凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对11个酶系统进行了检测,共发现20个酶位点,其中14个为多态位点,多态性位点百分数为70%。在参加计算的7个酶系统的12个多态性位点中,平均每个位点的等位基因数(A)和平均每位点等位基因有效数(Ae)为2.733和1.794,平均每个位点的实际杂合度(Ho)和预期杂合度(He)为0.3...
摘要分别从对氰烯菌酯敏感和抗性禾谷镰刀菌菌株中诱导了22个和50个nit突变体。通过比较它们的生物学特性表明,nit突变体在菌丝生长速率、培养形状以及致病性方面与其亲本没有显著差异,但是无性繁殖和有性繁殖能力有所改变。同时实验还表明,禾谷镰刀菌对氰烯菌酯和氯酸盐不存在交互抗性,且对氰烯菌酯和氯酸盐的双重抗性能够稳定地遗传。因此,可以将nit 作为一个优良的遗传标记研究禾谷镰刀菌对氰烯菌酯的抗药性遗...
摘要从新疆阿尔金山地区阿乌拉仔盐湖分离纯化到几株极端嗜盐古生菌AJ11, AJ12和AJ13, 采用PCR技术分别扩增了其16S rRNA基因(16S rDNA)和编码螺旋C至螺旋G的细菌视紫红质(bacteriorhodopsin, BR)蛋白基因片段, 测定了基因的核苷酸序列。基于16S rDNA序列的同源性比较以及系统发育学研究表明, 分离到的菌株是Natrinema属中成员, 并构成一个独...
转座子Tn233(CH)链霉素敏感突变种及其回变种的研究
中国科学院上海植物生理研究所
2008/1/25
摘要 转座子Tn233-1(CH)是Tn233(CH)的链霉素敏感突变种,比较了突变种质粒pBR322::Tn233-1(CH) DNA和野生型质粒pBR322: :Tn233-1(CH)DNA的EcoRl, BamHI, HindIII与PstI限制性内切酶图谱,结果表明Tn233-1(CH)中带链霉素抗性基因的限制片段H3上插人了一个约800bp长的IS因子, 在这个插入的DNA 片段上有一...
红霉素链霉菌突变株的生化互补和红霉素生物合成途径的研究
2008/1/25
摘要 红霉素链r l}-菌经不同诱变因素处理后,采用琼脂块法大量筛选得到26株无活性菌株,再用琼脂条共合成方法测定了这些无活性菌株351对互补菌株对,其中85对有一共合成能力的生化互补菌株。根据供体菌与受体菌(或转化菌)生化互补共合成红霉素的特性,26株无活性菌株可分为4个类群:这4个类群液体培养共合成试验结果,有的互补对红霉素产量在1,500微克/毫升以上,这为提取和研究红霉素生物合成的中间产物...
摘要营养期杀虫蛋白(Vip)是苏云金杆菌在营养期所产生的一类新型杀虫蛋白, 代表了第二代转基因杀虫蛋白, 它能在一定程度上克服许多害虫对δ-内毒素低敏感或者不敏感的缺陷。但是, 目前和已经深入研究的δ-内毒素相比较, 有关Vip蛋白结构和功能关系方面的报道还甚少。本文采用最大似然方法和基于最大简约的滑窗分析对Vip蛋白的分子进化机制进行了评价。结果发现Vip蛋白在进化过程当中经历了正选择, 并采用...
摘要以pTR102为载体构建重组质粒pHN307,其上克隆有来自苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的四碳二羧酸转移酶基因dctABD、来自肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)的nifA基因和来自pDB30所含的发光酶基因luxAB。经三亲本接合转移,将pHN307导入费氏中华根瘤菌(S.fredii)HN01,YC4和GR3,并考察了转移接合子中p...
本文利用基因重组的方法, 将宋内I相O抗原基因以及霍乱毒素B亚单位基因(ctx-B)克隆至带链球菌的asd基因的表达载体,然后转化至asd-的痢疾菌苗株福氏2aT32。脂多糖银染以及Western blotting实验证实以上两基因都能在宿主菌中稳定表达。动物(小白鼠)保护实验表明,该重组菌对福氏2a、宋内氏痢疾菌的保护效率达100%,对霍乱弧菌的保护效率也达70 %。该菌具有稳定、无抗生素标记、...
乙肝表面抗原专一的单链嵌合抗体在大肠杆菌中的表达
乙肝表面抗原 单链嵌合抗体 热敏诱导表达 分泌表达
2008/1/22
摘要利用重组PCR技术将乙肝表面抗原专一单抗的Vk与人源的Ck基因拼接成轻链嵌合抗体Vk-Ck,再通过编码柔性肽段(Gly4Ser)3的Linker与VH连接成单链嵌合抗体ScFv-Ck,并分别在大肠杆菌的热敏与分泌型表达系统中进行表达。表达产物的Western-blot与间接ELISA检测结果表明,ScFv-Ck在两种系统中的表达产物均具有抗原结合活性,并且在分泌肽的指导下ScFv-Ck能被E....
痢疾杆菌大质粒的快速分离与检测1)
痢疾杆菌 质粒 快速分离
2008/1/22
质粒是细菌染色体外小的共价闭环DNA (cccDNA)。质粒的分离与检测是微生物遗传学、基因工程等研究中的基本手段之一。Kopeckots,叙述了痢疾杆菌大质粒的分离方法,但过程较繁。国内分离痢疾杆菌大质粒并检测其分子量的工作尚未见报道。
变铅青链霉菌启动子的克隆和表达
启动子 新霉素抗性 变铅青链霉菌
2008/1/21
利用启动子探测质粒pIJ486(Tsr r Neo s)将变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)TK24染 色体DNA的BamHI酶切片段插入pIJ486的BamHI位点。获得4个硫链丝菌肽抗性、新霉素抗性的 重组质粒。它们分别命名为pMG1(10.6kb)、pMG40(7.6kb)、pMG50(10.8kb)和pMG88(7.92kb) 。BamHI酶切分析及再转化试验表明,...
北京动物园动物肠道菌携带抗药性质粒的分离
2008/1/21
分离 254种动物的肠道菌,其中兽类127种、鸟类78种、爬行类33种、两栖类4种、鱼类12种。用5种抗生素进行抗性测定后,分离到271株抗性菌株。用接触转移实验测定, 其中41株的抗性可以转移,抗性不能转移的菌株经SDS消除实验测定,结果有154株的抗性可以消除。将抗性能转移的菌株和10%的抗性不能转移但经SDS可以消除的菌株,用抽提DNA或制备溶菌物进行DNA琼脂糖凝胶电泳测定,除染色体带外,...
λ原噬菌体缺失突变株的诱导和分离
λ原噬菌体 突变株 诱导 分离
2008/1/21
对CSH45(λcI85S7)菌株进行热诱导(42℃),原噬菌体DNA产生部分缺失的菌株,然后用λcI b221进行感染,并通过EMB-麦芽糖平皿进行粗筛。最后在不同温度条件下,分别以λvir和 cIb221感染,从而分离得到5株所需菌株,筛选频率为10%。这些菌株在EMB-麦芽糖平皿上为 红色菌落。在32℃时能被λvir裂解,而对λcIb221具有免疫性;在42℃时既能被λvir裂解 ,也能被λ...
近年来,酿酒酵母的细胞调亡研究取得了很大进展。多种因素可以诱导其调亡,譬如过氧化氢(H2O2)、醋酸、高渗透压和高盐浓度等。葡萄糖是酿酒酵母生长所必须的重要营养物质之一。同时,在其他营养元素缺乏的条件下,只用葡萄糖培养将迅速的诱导酿酒酵母的细胞凋亡。Ste20是PAK (p21 activated kinase)家族的成员,它参与酿酒酵母的信息素应答、假菌丝生长和侵入生长等途径。有研究表明,ste...
pUB110质粒转化枯草杆菌Ki—2株及其突变体的研究1)
2008/1/21
摘要迄今文献中报道枯草杆菌基因克隆化都采用枯草杆菌168株及其突变体。本文采用我们分离的枯草杆菌Ki—2株及其突变体Ki—2---32(Thr-Ile-Val-)和Ki—2---148(Ura-)为pUB110)质粒DAN的受体菌株。用酸酚法提纯pUB110质粒DNV,在琼脂糖凝胶电泳上看不到样品中有染色体DNA的带。结果表明,Ki—2、Ki—2-132和Ki—2-132都可作pUB110质粒的受...