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补体C1q （Complement 1q）蛋白由A、B、C 3条多肽链构成，在维护机体内环境稳定、氧化应激、糖脂代谢等过程发挥重要作用。为研究牦牛C1QA、C1QB、C1QC基因的分子特性及在不同组织中的表达水平，探讨该基因对牦牛高原适应性的影响，通过克隆获得牦牛C1QA、C1QB、C1QC基因的CDS区序列，分析其核苷酸序列相似性并构建系统进化树；利用在线软件进行功能预测分析；采用实时荧光定量P...
全基因组选择信号揭示绒山羊绒毛性状相关的候选基因
内蒙古绒山羊 辽宁绒山羊 Fst XP-EHH
2021/3/8
旨在对辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊的基因组选择信号进行筛选。本研究利用Illumina 50K的山羊芯片，对内蒙古绒山羊、辽宁绒山羊和黄淮山羊进行基因型检测，质控后获得50 010个共同SNPs位点。通过群体分化系数Fst和XP-EHH，以黄淮山羊为参考群体分别对内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊进行选择信号检测，Fst和XP-EHH值的top 5%作为阈值。结果，利用Fst在绒山羊基因组中筛选到501个候选基...
为获得山羊PHKG1基因序列，明确其生物学特征，阐明其在山羊各组织及诱导分化不同阶段皮下和肌内脂肪细胞中的表达特性，以简州大耳羊为试验动物，屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背最长肌、皮下脂肪等组织样品，提取组织中总RNA，利用RT-PCR方法克隆山羊PHKG1基因序列，利用各种在线工具分析其生物学特性，利用实时荧光定量PCR （Real-time quantitative PCR，qPCR...
旨在制备禽致病性大肠杆菌（APEC）染色体编码外膜蛋白（cOmpT）的特异性单克隆抗体，本研究利用实验室已构建的APEC cOmpT重组表达质粒pET-28a-compT，经IPTG诱导表达后，获得以包涵体形式存在的约36 ku的重组蛋白cOmpT，利用尿素浓度梯度透析复性获得纯化蛋白cOmpT，并以此免疫BALB/c小鼠。建立间接ELISA检测方法，最适抗原包被浓度为0.625 μg·mL-1，...
簇状规则间隔的短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）系统是一种针对入侵核酸的可遗传性原核适应性免疫系统。CRISPR/Cas系统可以产生高度特异性的基因双链断裂，并通过非同源末端连接（NHEJ）或者同源重组（HR）进行修复，如今已经成为许多生物方便有效的基因组编辑工具。结核分枝杆菌因其基因操作的复杂性，其基因组研究存在诸多困难，因此，CRISPR/Cas系统的出现对结核分枝...
1例肉鸡肝恶性黑色素瘤的病理学诊断
肉鸡 肝 黑色素瘤 病理学诊断
2021/3/8
本研究旨在对临床上发现的1例肉鸡肝黑色素瘤进行病理学诊断。1羽25日龄AA肉鸡精神沉郁、极度消瘦，剖检发现其整个肝呈黑色。HE染色结果显示，病变肝内遍布大小不一、细胞核深染、细胞质内有大量黑色素颗粒沉积的异常细胞团。黑色素瘤诊断标志蛋白SOX 10和HMB-45抗体免疫组化染色均呈阳性。结合病理学检测和免疫组化结果，判定该病鸡肝患有恶性黑色素瘤。试验对病变肝进行胆色素染色和普鲁士蓝染色，结果均呈阴...
为明确羊口疮病毒ORFV129锚蛋白在细胞中的定位，参照GenBank中收录的ORFV SY 17全基因组（登录号：MG 712417.1）序列设计引物，扩增ORFV129基因完整编码框并测序鉴定，利用生物信息学软件分析该基因编码蛋白的氨基酸序列、蛋白跨膜区域，预测其亚细胞定位；并将ORFV129完整基因连接到真核表达载体pEGFP-N1，经双酶切鉴定及测序鉴定是否成功构建重组表达质粒pEGFP-...
本试验旨在研究不同氨气浓度对肉牛生产性能、免疫和抗氧化能力的影响。选取16头初始体重为（220±5）kg的健康秦川母牛，随机分为4组饲养于4个环控舱内，每组4个重复，每头牛为1个重复。将氨气浓度分别设置为<5（对照组）、（15±3）、（30±3）和（45±3）mg·m-3。预试期为10 d，试验期为30 d。试验期间记录生产性能（日增重、日采食量和料重比），并于试验第1、15和30天颈静脉采集血清...
旨在利用同源重组构建敖汉细毛羊Hoxa5、BMP6基因表达载体及共转染成纤维细胞后通过基因表达量变化研究两基因之间的相互作用关系。以敖汉细毛羊为研究对象，采集30日龄的胎羊。首先，通过RNA的提取反转录成cDNA参照GenBank中Hoxa5、BMP6基因序列和pcDNA3.1序列分别设计1对含有同源臂的引物，通过PCR反应扩增获得Hoxa5、BMP6基因片段、利用SoSo试剂盒将目的片段连接到p...
姜黄素固体分散体在猪体内的比较药动学研究
姜黄素 固体分散体 药动学 断奶仔猪
2021/3/10
本研究首次建立了测定猪血浆中姜黄素的高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS），比较了在内服给药途径下，姜黄素固体分散体和姜黄素预混剂在仔猪体内的药动学特征。选用16头7周龄左右健康二元杂交猪（约克夏×长白），公母各半，随机分为2组，每组8头，按100 mg·kg-1（以姜黄素计）分别灌服姜黄素固体分散剂和姜黄素预混剂，不同时间点采集血浆样品，经提取、净化后采用HPLC-MS/MS测定血浆中姜...
冷暴露下骨骼肌中O-GlcNAc（O-linked β-N-acetylglucosamine）糖基化修饰水平显著升高，作为"应激感受器"调控细胞信号转导及基因转录等；而骨骼肌作为分泌器官通过收缩产生的肌源性IL-6具有免疫作用，更能够调节骨骼肌中糖、脂代谢。本试验旨在检测不同时长冷暴露下小鼠成肌细胞系C2C12中O-GlcNAc相关蛋白和IL-6表达变化，初步探究冷暴露下O-GlcNAc与IL-...
旨在探讨铜中毒对大鼠肾组织炎性因子的表达和细胞增殖功能的影响。本研究选用32只20日龄健康大鼠随机分为4组，每组8只，其中，对照组日粮的铜（Cu）浓度为15 mg·kg-1；高铜Ⅰ组日粮Cu浓度为30 mg·kg-1；高铜Ⅱ组日粮Cu浓度为60 mg·kg-1；高铜Ⅲ组日粮Cu浓度为120 mg· kg-1。连续饲喂6个月，检测肾组织Ki-67、PCNA、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-18...
常见耐药基因多重PCR方法的建立及用于禽致病性大肠杆菌耐药性监测
耐药基因 多重PCR 检测
2021/3/9
本研究旨在建立β-内酰胺类、四环素类、氨基苷类、酰胺醇类、磺胺类抗菌药物耐药基因的多重PCR检测方法，用于耐药基因的快速检测。根据GenBank公布的上述5类抗菌药物的耐药基因序列，设计17对特异性引物。通过优化PCR体系和反应程序，建立4组耐药基因（cat+floR+tetB+tetC；dfrA12+sul2+sul1+blaCTX-M+balTEM-1；aac3+aph3+aadA1+strB...
旨在探究大熊猫粪便中微生物组成以及耐药基因和寄生虫的真实情况。采集6只健康成年大熊猫的新鲜粪便，利用宏转录组学测序技术分析大熊猫粪便微生物组成及功能、耐药基因种类、丰度和寄生虫的组成，探讨优势细菌与耐药基因的相关性。结果表明，大熊猫粪便内微生物种类多样，包括细菌、真菌和病毒等，但以细菌为主。在门水平上，细菌类群中厚壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）为优势菌门，...