搜索结果: 31-45 共查到“农学 Cas9”相关记录46条 . 查询时间(0.035 秒)
制备抗CAS9蛋白质的单克隆抗体，建立转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印迹检测方法，了解CAS9蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以带Cas9的质粒DNA为模板，PCR扩增Cas9 5′端810 bp片段后克隆到pET30a载体中，将酶切验证且序列正确的重组质粒转入表达菌Condon Plus中，经IPTG诱导表达CAS9蛋白质（N端270氨基酸），用纯化的重组蛋白质作为免疫原免疫小鼠，制备...
利用CRISPR/Cas9技术编辑粒长基因GS3改善粳稻花时
粳稻 花时 CRISPR/Cas9 GS3
2018/7/10
【目的】花时不遇是影响杂交水稻制种产量的直接因素之一，已有研究表明水稻粒型差异对花时有影响。本研究采用GS3功能缺失突变来研究粳稻花时差异，以期为粒型影响花时提供佐证。【方法】利用CRISPR/Cas9技术来定向编辑控制粒长基因GS3，获得13对粒型差异的近等基因系粳稻，小区种植，采用目测法来调查花时。【结果】获得转基因T0植株并对其T1植株测序分析，发现长白25、吉粳102、浙粳88、武运粳27...
利用CRISPR/Cas9系统定向编辑水稻SD1基因
CRISPR/Cas9 基因编辑 水稻 半矮秆基因
2018/7/6
【目的】半矮秆水稻品种的选育和应用是水稻育种的最重大成果之一。半矮秆品种大多是半矮秆基因SD1(semi-dwarf1)功能缺失突变体，为了获得sd1突变体，本研究对SD1基因进行了定向编辑。【方法】利用CRISPR/Cas9系统，以SD1基因为靶基因，构建基因编辑载体CRISPR-SD1，用农杆菌介导的方法转化水稻恢复系申繁17和申繁24。【结果】在2个转化受体的T0代均获得了纯合的sd1突变体...
CRISPR/Cas9系统编辑水稻Wx基因
水稻 CRISPR/Cas9系统 Wx 基因编辑 直链淀粉含量
2018/3/15
【目的】直链淀粉含量与稻米品质密切相关。Wx基因是控制水稻直链淀粉合成的主效基因，通过对Wx基因定点编辑以获得稳定遗传、直链淀粉含量适宜的突变体。【方法】构建CRISPR/Cas9表达载体pGK03-Wx-gRNA (靶点1和2分别在Wx基因第1和第2外显子)，利用工程菌EHA105遗传转化超级稻楚粳27，潮霉素筛选获得转化株系，对转化株系及其后代进行分子检测、测序、基因表达和遗传稳定性分析以及直...
创建一种简单高效的CRISPR-Cas9突变体筛选方法（图）
CRISPR-Cas9 突变体 筛选方法
2017/5/26
近日，我所水稻染色体工程及基因组编辑创新团队与苏州大学黄健课题组合作, 基于常规聚合酶链式反应（PCR）原理，成功开发出临界退火温度PCR (ACT-PCR)用于快速高效地筛选基因编辑突变体。相关研究成果于04月 04日在线发表于《遗传学与基因组学（Journal of Genetics and Genomics）》杂志。随着CRISPR-Cas9基因组编辑技术的广泛应用，科研人员需要进行大量的突...
香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系的建立
香蕉 CRISPR/Cas9 MaPDS 基因编辑
2017/11/14
建立香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系，为在香蕉上利用CRISPR/CAS9技术开展香蕉基因功能研究和香蕉育种工作开辟新的路径。【方法】根据香蕉A基因组八氢番茄红素脱氢酶（phytoene dehydrogenase，PDS）基因组序列，利用在线工具ZiFiT Targeter Version 4.2确定合适的CRISPR/Cas9靶标序列，选择其中一个位点作为靶标位点，设计包含靶标基因M...
利用CRISPR/Cas9系统定向改良水稻粒长和穗粒数性状
CRISPR/Cas9 基因编辑 水稻 GS3 Gn1a
2018/2/1
【目的】基因组定点编辑技术已成为分子育种的重要手段。本研究拟对GS3和Gn1a功能缺失突变对目标性状的改良效应进行分析，以期为培育高产水稻提供理论基础。【方法】利用CRISPR/Cas9系统，以控制粒型基因GS3和控制每穗粒数基因Gn1a为编辑对象，构建了共敲除载体pC1300-2×35S::Cas9-gGS3-gGn1a，用农杆菌介导法转化4个优质水稻品种，分析了基因突变的特征和相应农艺性状。【...
基因编辑技术CRISPR/Cas9又立新功。曾成功克隆出多莉羊的英国爱丁堡大学罗斯林研究所近日发布公告称，该校科研团队再次取得“震惊世界”的科研突破：他们使用这一最新基因编辑工具，培育出一批能抵御致命性猪蓝耳病病毒感染的“超级猪”。这一技术一旦获得使用许可，全世界养猪产业将每年减少数十亿英镑损失。相关研究发表在最新一期的美国《公共科学图书馆·病原体》杂志上。
CRISPR/Cas9介导RB1基因敲除及其在鸡前脂肪细胞分化、增殖中的功能研究
CRISPR/Cas9 RB1 鸡 脂肪沉积 分化 增殖
2016/10/31
旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能，本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因，检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明，CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引起RB1基因翻译的提前终止，敲除效率可以达到10%。油红O提取比色和CCK-8的结果显示，敲除RB1基因后，鸡前脂肪细胞的分化能力减弱、增殖能力增强；...
CRISPR/Cas9技术的应用性研究
CRISPR/Cas9 遗传操作 基因敲除 基因反转 基因重复
2016/7/26
旨在探索CRISPR/Cas9技术的新应用，本研究通过在小鼠遗传操作（Genetic manipulation）中使用该技术，创建了一种在活体组织内研究基因功能的方法。通过胚胎电转、免疫组化和PCR分析等手段，结果发现，针对DCX基因进行编辑，再现了DCX下调导致神经元迁移障碍的表型，说明该技术能够用于小鼠遗传操作中下调基因表达；其次，该技术还成功应用于Pcdhα基因簇的编辑并研究了基因簇恒定区的...
CRISPR/Cas(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated (Cas)系统是由一种短小RNA调控的对DNA修饰的基因编辑工具，是一种较锌指核酸酶（Zinc-fingers nuclease，ZFN）和转录激活因子样效应物核酸酶（Transcription activat...
利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2
水稻 Badh2 CRISPR/CAS9 香味
2018/2/2
【目的】香稻作为一类特殊的水稻群体，以其清香可口的品质特性备受消费者的欢迎。到目前为止，水稻中的香味主要受第8染色体上编码甜菜碱醛脱氢酶基因Badh2控制。【方法】通过CRISPR/CAS9技术对中花11的香味基因Badh2进行编辑。【结果】获得转基因T0代植株并对其所衍生的T1代20个单株进行了鉴定分析，获得了一个剔除了载体骨架且第1外显子上插入一个碱基T 的突变体材料。该材料中Badh2 RN...
以水稻OsbHLH116 基因为编辑对象，根据基因编码区序列（CDS）在第一外显子区域设计长度为19 bp的sgRNA，化学合成sgRNA的寡核苷酸序列，然后与CRISPR/Cas9系统表达载体pBUN411连接，再用农杆菌介导法获得水稻转基因株系，最后利用酶切和测序相结合的方法对OsbHLH116 突变体进行了筛选鉴定和脱靶效应分析。结果表明，所构建的pBUN411gRNA载体成功实现了对基因...
利用CRISPR/Cas9技术敲除水稻Pi21基因的效率分析
CRISPR/Cas9 稻瘟病 Pi21 基因敲除
2018/1/9
利用CRISPR/Cas9技术，针对Pi21基因的两个靶位点（靶位1和靶位2），构建基因敲除载体，转化水稻品种南粳9108。经PCR鉴定，获得了28株T0代阳性转基因植株。对靶位点酶切检测发现，靶位 1突变效率为78.57%，靶位 2突变效率为92.86%；靶位 1和靶位 2同时突变的效率为78.57%，突变效率较高。通过对靶位点进行测序，发现靶位点突变类型较多，包括碱基缺失、碱基插入、碱基缺失后...
利用CRISPR-Cas9系统定点突变猪MSTN基因的研究
CRISPR-Cas9系统 基因组编辑 突变率
2016/1/26
为了今后能够有效的利用CRISPR-Cas9系统进行基因功能研究及转基因动物的培育，本研究将带有绿色荧光蛋白（GFP）和肌肉生长抑制素基因（Myostatin，MSTN）靶序列的CRISPR-Cas9系统转染入PK15细胞系，利用流式细胞仪分离并收集转染成功的阳性细胞，使用PCR扩增结合克隆测序的方法检测和分析CRISPR-Cas9系统的定点突变情况，以评价CRISPR-Cas9系统的作用效果。结...