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siRNA沉默RhoC表达诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡
RhoC基因 siRNA 肝肿瘤 凋亡
2012/4/18
研究siRNA沉默RhoC基因表达对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响及其机制，为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法: 构建RhoC-siRNA真核表达载体pU6mRFP RhoC-siRNA，转染BEL7402细胞，激光共聚焦显微镜检测转染效率，RT-PCR和Western blotting鉴定RhoC基因沉默效果；流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和瑞氏染色检测BEL7402细胞凋亡，R...
研究靶向抑制二肽基肽酶-Ⅳ（DPP-Ⅳ）基因的小干扰核糖核酸（siRNA）对糖尿病模型小鼠的降糖作用。方法：根 据DPP-Ⅳ的refseq 序列及siRNA 设计原理设计3 条靶向作用于DPP-Ⅳ基因不同位点的siRNA（siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3）；另 取小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素150 mg·kg－1建立糖尿病模型，成功后随机分为模型对照组、siRNA-1 组、siRNA...
Survivin是IAP家族的新成员，具有抑制凋亡和调节细胞增殖的双重作用，是迄今发现最强的凋亡抑制因子。本项研究的目的是通过将survivin的小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）表达载体分别转染至肺癌细胞SPCA1和SH77，分析survivin siRNA对不同肺癌细胞的增殖抑制作用。方法 构建靶向survivin的siRNA表达载体与pSi scramb...
siRNA抑制食管癌EC9706细胞CXCR4基因表达的实验
CXCR4 RNA干扰 食管癌 转移
2013/12/26
运用RNAi技术沉默食管癌EC9706细胞CXCR4（chemokine receptor4）基因表达,观察其对肿瘤细胞的生长和转移影响。方法设计CXCR4 基因为靶向的siRNA ,构建siRNA表达载体，通过脂质体将siRNA表达载体转入EC9706细胞。荧光定量PCR法检测细胞CXCR4 mRNA表达水平；流式细胞术检测细胞周期； MTT法检测细胞侵袭和增殖的情况。结果构建出CXCR4 基因...
EGFRvⅢ的siRNA对胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响
表皮生长因子Ⅲ型突变体 RNA干扰 胶质瘤 U87
2013/12/26
研究EGFRvⅢ的siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞中EGFRvⅢ的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响。 方法化学方法合成特异针对EGFRvⅢ的siRNA，转染U87-EGFRvⅢ细胞后，利用半定量RT-PCR法检测细胞中EGFRvⅢ的mRNA表达，采用蛋白印迹法和免疫荧光法检测细胞中EGFRvⅢ的蛋白表达水平，MTT法检测siRNA对胶质瘤细胞增殖的作用，Annexin V-FITC/PI法...
研究Bcl-xL基因特异性RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞株体外增殖能力和凋亡的影响。方法构建靶向Bcl-xL的小干扰RNA(siRNA)表达载体，转染PC-3细胞后，采用半定量RT-PCR和Western blot法检测转染前后Bcl-xL mRNA及蛋白表达水平的改变；采用噻唑兰(MTT)法检测细胞生长增殖情况；TUNEL试剂盒测定细胞的凋亡情况。结果靶向Bcl-xL的序列特异性的siRNA可...
siRNA干扰CHRNA5基因的表达抑制尼古丁对人肺癌细胞的促增殖作用
α5-尼古丁乙酰胆碱受体 siRNA 肺癌 尼古丁 增殖
2012/5/17
研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5（cholinergic receptor nicotinic alpha 5, CHRNA5 ）基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响。 方法： 设计并合成CHRNA5-siRNA片段，并经脂质体介导转染A549细胞。荧光定量PCR、Western blotting检测转染后A549细胞中 CHRNA5 mRNA和蛋白的表达，MTT法检测C...
慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达的实验
血管内皮生长因子C RNA干扰 慢病毒载体 MCF-7
2013/12/27
研究慢病毒载体介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞系VEGF-C表达的敲减作用。方法构建慢病毒VEGF-C/siRNA载体，转染乳腺癌MCF-7细胞，采用Real-time PCR检测MCF-7细胞在转染前后VEGF-C的mRNA表达，计算其转染效率和VEGF-C敲减率。结果慢病毒VEGF-C/siRNA转染效率超过80%，其VEGF-C的mRNA表达敲减率达50%。结论慢病毒VEGF-C/si...
合理设计siRNA下调锌指蛋白A20的表达促进DC成熟
树突状细胞 锌指蛋白A20 siRNA
2012/5/17
比较针对锌指蛋白A 20 基因不同位点的siRNA对正常人DC成熟度的影响。 方法： 根据A 20 基因序列特点，针对 A20 C端的锌指结构-5区（zinc finger-5,Zif-5）、Zif-2和N端的序列分别设计合成了Si1、Si2和Si3三条siRNA，以脂质体法转染正常人DC，RT-PCR和Western blotting检测DC中 A20 mRNA和蛋白表达水平，流式细胞术检测DC...
间皮素siRNA慢病毒对卵巢癌裸鼠移植瘤的治疗效果
间皮素 RNA干扰 慢病毒 基因治疗
2012/5/17
探讨间皮素（mesothelin,MSLN）siRNA慢病毒对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的治疗作用。 方法： 利用人卵巢癌SKOV3细胞建立卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。实验分为3组：治疗组、阴性对照组和空白对照组。治疗组应用携间皮素siRNA慢病毒液(LV-MSLN-shRNA)对裸鼠模型进行治疗，阴性对照组采用空载体(LV-MSLN-neg)慢病毒液进行治疗，空白对照组注射PBS治疗。从裸鼠生长一般情...
siRNA对胃癌AGS细胞中血管生成相关分子表达的影响
Rac1b siRNA 胃肿瘤 血管生成相关分子
2012/5/17
研究小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）抑制Rac1b表达后对胃癌AGS细胞血管生成相关分子表达的影响。 方法： 体外合成针对 Rac1b 基因的siRNA序列（ Rac1b siRNA），脂质体法转染AGS细胞，RT-PCR和Western blotting观察 Rac1b siRNA 对AGS细胞 Rac1b mRNA和蛋白水平表达的影响，ELISA和West...
泛素羧基末端水解酶-1（ubiquitin C terminal hydrolase-L1,UCH-L1）是近期研究较多的一类癌基因，在多种恶性肿瘤如食管癌、肺癌、乳腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究旨在探讨脂质体转染UCH-L1 siRNA对人肺腺癌H157细胞增殖、凋亡的影响。方法 人工合成抑制UCH-L1基因的siRNA片段，通过脂质体转染到H157细胞内，显微镜下观察其形态学变化；流式...
靶向cripto siRNA转染对裸鼠实验性大肠癌细胞肝转移的影响
大肠肿瘤 肝转移 畸胎瘤衍生生长因子-1
2010/10/15
目的 研究cripto基因对人大肠癌细胞迁移、侵袭和肝转移的影响。方法 以cripto基因mRNA小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）转染人大肠癌SW480细胞后，分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测cripto基因mRNA和蛋白水平，以划痕试验方法评测癌细胞迁移能力；用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。以脾切除法建立裸鼠大肠癌肝转...
构建可同时表达野生型p53 (wt-p53)及siRNA-mdm2的重组真核表达载体用于激素非依赖性前列腺癌的联合基因治疗。方法：利用亚克隆、T-A克隆和PCR技术合成并构建pcDNA3.1-p53、siRNA-mdm2、p53/siRNA-mdm2和siRNA-scramble重组质粒。脂质体法将上述重组质粒转染至PC-3细胞，半定量RT-PCR和Western blotting检测共表达质粒对...