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中国科学院福建物质结构研究所专利：一种DAB2IP蛋白的ELISA检测方法
制备高活性EB病毒立即早期蛋白Rta 优势表位抗原，并初步评价该抗原在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）诊断中的价值。方法 分析Rta 氨基酸序列，选取抗原优势表位Rta（301~440aa），合成目的基因， 连接pBVGST-6His 载体，构建重组pBV-Rta 表达质粒，进行诱导表达获得纯化抗原。采用间接ELISA 初步评价优势表 位抗原在鼻咽癌诊断中的价值...
为了建立一种敏感和特异的猪圆环病毒3型（PCV3）抗体检测方法，对PCV3-Cap蛋白抗原表位预测发现其抗原表位多聚集在C端（羧基端），而N端前33氨基酸为核定位序列。以截断N端前120个氨基酸后的PCV3 ORF2序列为靶基因，设计引物。以PCV3阳性病料为模板，PCR扩增截短的ORF2基因，并将其克隆至pET-30a载体构建重组质粒，并转染至大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞，获得重组菌...
山东农业大学基因工程综合实验课件实验十 酶联免疫吸附（ELISA）技术检测病毒。
为建立胞内劳森菌特异性抗体检测方法，将密码子优化合成的胞内劳森菌表面蛋白LsaA的编码基因克隆于pET32a（+）载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。用纯化的重组LsaA蛋白作为包被抗原，通过一系列条件优化，建立了检测胞内劳森菌抗体的间接ELISA方法。结果显示：该方法可以特异地检测抗胞内劳森菌抗体，与大肠杆菌、猪霍乱沙门菌、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒等常见猪腹泻病原的抗血清均...
检测猪流行性腹泻病毒S1蛋白抗体的间接ELISA方法
猪流行性腹泻病毒 重组PEDV S1蛋白 间接ELISA 初生仔猪 母源抗体
2017/7/12
为了建立检测猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）抗体的间接ELISA方法，初步分析PED灭活疫苗免疫母猪所产仔猪的血清母源特异抗体动态，笔者应用重组PEDV部分纤突（spike，S）蛋白作为检测抗原，建立了基于PEDV S1蛋白的间接ELISA抗体检测方法，并用该方法检测了产前4周用PED灭活疫苗免疫母猪的初乳、分娩当天血清及其仔猪1、7、1...
The development and application of an indirect Elisa test for the detection of antibodies to bovine respiratory syncytial virus in blood serum
bovine respiratory syncytial virus (BRSV) respiratory tract pathogen cattle ELISA
2015/1/20
We developed an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of serum antibodies to bovine respiratory syncytial virus. For evaluation of the newly developed ELISA, field sera coll...
本研究利用已经筛选的抗新霉素单克隆抗体,直接与辣根过氧化物酶相偶联,确定其相应的工作浓度,建立了快速半定量ELISA试剂盒。结果表明,本研究研制的新霉素(NEO)阻断ELISA试剂盒可在30min内进行半定量检测,其特异性较强,与其它氨基糖苷类抗生素的交叉反应均比较低;试剂盒的在奶样、饲料和肌肉样品的检测限均为1μg·L-1;NEO-Kit在4℃至少可以保存6个月以上;试剂盒与液相色谱-二级质谱联...
庆大霉素单克隆抗体的研制及ELISA分析方法的建立
庆大霉素 单克隆抗体 竞争ELISA
2013/9/5
用与牛血清蛋白(BSA)交联的庆大霉素人工抗原(GM-BSA)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,得到1株能稳定分泌抗庆大霉素单抗的杂交瘤细胞株(6H8),经鉴定6H8的抗体类型及亚类均为IgG1, 其轻链为κ链。制备单克隆抗体腹水,腹水的间接ELISA效价在1 × 10-7以上。该单克隆抗体与庆大霉素结构类似物均无交叉反应,具有高度特异性。以制备的单抗建立间接竞...
采用抗猪囊尾蚴头节蛋白单克隆抗体包被ELISA板,以兔抗猪囊尾蚴头节蛋白多抗作为捕获抗体,建立了猪囊尾蚴头节双抗体夹心ELISA检测方法，用该方法分别检测猪囊尾蚴、棘球蚴和猪蛔虫具有良好的特异性。用ELISA和RT-PCR同时检测120份样品,ELISA的特异性和敏感性分别为98.1％和80.0％,2种方法的符合率为95.8％。
厦门大学现代生物学实验课件三 微生物学与免疫学实验模块六 基础免疫学研究技术 lab-8酶联免疫吸附试验（ELISA）
厦门大学 现代生物学实验 课件 基础免疫学 吸附试验 lab-8酶联免疫
2009/4/20
厦门大学现代生物学实验课件三 微生物学与免疫学实验模块六 基础免疫学研究技术 lab-8酶联免疫吸附试验（ELISA）。
主要内容：通过对8个大型养狐场13545只狐狸调查，分离了该病病原。针对病毒流行状态、分布、危害程度、临床发病特征以及不同狐种、不同饲养方式对该病的相关性，制定了有效的防治措施；分离鉴定FAN-2型病毒株，确诊了中国存在狐喉气管炎，建立了狐脑间ELISA快速诊断技术；研究出狐脑炎传代细胞弱毒疫苗。制苗工艺简便，免疫期为一年，保护率高达95%。
混合单克隆抗体在固相ELISA双夹心法中的应用研究
单克隆抗体 固相酶联免疫测定
2007/12/21
摘要 在进行固相ELISA双夹心法时,要选择两种配对的单克隆抗体(McAb)殊非易事。本文用不同McAb的混合物与另一种McAb进行配对夹心,获得了较好的效果。实验表明,在心肌肌球蛋白轻链(CM—LC)的固相ELISA双夹心体系中,以抗CM-LCMcAb(1G6)铺底,(2B4及2F6)混合物为后续复盖抗体,最低检出量可低达10ng/mL,其检出率较单独2B4或单独2F6作为后续复盖抗体者高5—1...
参照APP血清1型apxlVA基因序列合成了一对特异性引物，从本实验室分离鉴定的胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2 型中扩增了apxIVA基因5 端2445bp的片段。将该片段克隆到原核表达栽体pET一28b的T7启动子下游，与6×His Tag融合，再转化大肠杆菌BL21(DE3)，在IPTG的诱导下表达大小约90kD的蛋白。表达产物以包涵体的形式存在，且能与APP标准阳性血清发生特异性反应。将包...
利用谷胱甘肽一s一转移酶(GST)表达系统将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因依序串联于GST下游，并在大肠杆菌中成功表达，获得了大小约为60kD的融合蛋白GST—GP5一M，Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原建立了猪繁殖与呼吸综合征P56一ELISA检测方法，与国外试剂盒IDEXX—ELISA总符合率为94．1％ ...