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利用GFP示踪细胞内源性P53活性检测DNA损伤
绿色荧光蛋白 P53 DNA损伤 检测
2008/1/7
DNA损伤的检测对预防癌症和遗传病等非常重要。采用分子克隆技术，将报告基因―绿色荧光蛋白（GFP）置于SV40基本启动子调控下，构建成对照载体pSV-GFP。在SV40基本启动子上游插入寡核苷酸P53RE，构建成示踪载体p53RE-GFP。转染NIH 3T3细胞，以GFP示踪细胞内源性P53的转录激活活性。紫外线照射或H2O2处理转化细胞使DNA损伤，诱导细胞内源性P53的表达。用激光扫描共聚焦成...
GFP为报告基因的酵母哺乳动物细胞穿梭载体的构建及其在人血管内皮细胞中的表达
酵母 穿梭载体 口服基因治疗
2007/12/19
摘要 为研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用 ,需要一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞中表达的穿梭载体 .利用通用载体质粒融合系统 (UPS)构建了一种以GFP为报告基因的新载体 ,以常规的氯化锂法对酿酒酵母进行转化 ,证明该载体能够在酵母中复制 ;以脂质体介导向人血管内皮细胞进行了转染 ,有绿色荧光 ,证明该载体能够在哺乳动物细胞中表达 .所获得的新型的穿梭载体为口服酵母在基因治疗中的...