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大豆ISSR-PCR反应体系的优化
大豆 ISSR-PCR 体系优化
2015/9/24
以黑龙江省大豆为材料,利用正交试验设计,对大豆ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(Mg2+、引物、dNTPs、模板DNA量、Taq酶量)在4个水平上进行体系优化。结果确定了大豆ISSR-PCR反应的最佳体系(25 μL)为:Mg2+浓度1.85 mmol·L-1、dNTPs浓度1.2mmol?L-1、引物浓度1.2μmol?L-1、模板DNA60 ng、Taq酶量0.7 U。利用该最佳体系,...
蕺菜ISSR PCR反应体系的建立及条件优化
蕺菜 ISSR PCR 体系优化
2009/10/21
[目的]针对蕺菜ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系,为进一步研究蕺菜的居群遗传多样性奠定基础。[方法]通过筛选引物并设定影响蕺菜ISSR反应各因素的浓度,检测ISSR不同反应体系的扩增效果;通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立蕺菜ISSR稳定可靠的反应体系。[结果]建立了可用于蕺菜ISSRPCR分析的最适宜反应体系。Taq酶质量、退火温度、Mg2...
黄皮ISSR-PCR反应体系的优化
黄皮 ISSR-PCR 优化
2009/10/14
采用单因素和正交试验对ISSR-PCR扩增黄皮基因组DNA的主要影响因子进行筛选和分析,建立了适宜于黄皮ISSR分析的扩增体系:20 μL的反应体系中含30 ng的模板DNA、1.5 U TaqDNA聚合酶、0.4 μmol/L引物、0.3mmol/L dNTPs以及引物(gA)8C的最佳退火温度为52.4℃。