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自然养殖水体投喂CpG ODN和表面展示VP28的解脂耶罗维亚酵母对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)抗WSSV的免疫保护作用
CpG ODN 解脂耶罗维亚酵母 外膜蛋白VP28 白斑综合征病毒 抗病毒免疫
2015/5/22
用添加CpG寡聚核苷酸(CpG ODN)和表面展示VP28的解脂耶罗维亚酵母(VP28-yl)的饵料投喂凡纳滨对虾，进行田间中试实验。投喂30 d后进行WSSV感染实验，评估其对凡纳滨对虾的免疫保护作用。投喂实验结束后，CpG ODN投喂组对虾的相对增重率达到(65.8±7.8)% (P<0.05)，这暗示CpG ODN可能具有促生长作用。WSSV攻毒后，CpG ODN和VP28-yl投喂组对虾中...
将VP110基因的部分序列克隆到pET-28a载体中构建pET28a-vp110b重组质粒并进行原核表达，获得重组表达的蛋白rVP110-B；用rVP110-B注射凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei后，经WSSV感染，实验表明，该蛋白注射使凡纳滨对虾感染WSSV的半数死亡时间比对照组延长了20%。用表达纯化的该重组蛋白制备了兔抗rVP110-B多克隆抗体，该抗体用于凡纳滨对虾鳃细胞...
研究了铜绿微囊藻（Microcystis aeruginosa）和蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）携带白斑综合症病毒（white spot syndrome virus, WSSV）数量变化及对水体游离WSSV量的影响。试验设置微藻高、低密度组和不加微藻的对照组，分别加入等量的WSSV粗提液，于第2、第24、第72和第120小时以实时荧光定量PCR检测藻液上清和沉淀藻体的...
用含3×103 拷贝•mL-1、6×102 拷贝•mL-1和2×102 拷贝•mL-1的对虾白斑综合征病毒（white spot syndrome virus，WSSV）粗提液和PBS液对照注射感染病毒携带量约1×105 拷贝g-1的斑节对虾（Penaeus monodon），分别于第15分钟、第30 分钟、第1小时、第3小时、第6小时、第12小时、第24小时、...
采用单胞藻（SA）、配合饵料（AF）、轮虫（BP）和卤虫幼体（BS）4种饵料，设计了SA+AF、SA+AF+BP、SA+AF+BS和SA+AF+BP+BS 4种饵料组合并用于中国对虾苗种培育，投喂SA+AF饵料的受精卵分设“碘伏”消毒及未消毒组，投喂其他饵料的受精卵均为“碘伏”消毒组。分析各期幼体成活率、P10体重及WSSV携带量，结果表明，N-Z期间，受精卵消毒与否及投喂不同饵料对中国对虾的成活...
用含3×103 拷贝•mL-1、6×102 拷贝•mL-1和2×102 拷贝•mL-1的对虾白斑综合征病毒（white spot syndrome virus，WSSV）粗提液和PBS液对照注射感染病毒携带量约1×105 拷贝g-1的斑节对虾（Penaeus monodon），分别于第15分钟、第30 分钟、第1小时、第3小时、第6小时、第12小时、第24小时、...
中国对虾不同凝集素基因应答WSSV侵染的表达差异
中国对虾 白斑综合征病毒 细胞凝集素 表达差异
2015/6/2
本研究探讨了7种细胞凝集素基因在中国对虾中应答白斑综合征病毒（WSSV）感染上的生物学功能差异。结果显示，LT1（DQ167572.1）、LT2（EU834289.1）、LT3（EU834292.1）和LT5（EU834290.1）是肝胰腺组织特异、受WSSV感染诱导表达的基因，其他3种基因主要在肌肉、肠和腮中表达，与WSSV感染诱导无明显相关；在应答WSSV感染不同时间段的表达特征上，7种凝集素...
vp28重组核酸疫苗对凡纳滨对虾抗WSSV感染的免疫反应和保护效果
p28 疫苗 凡纳滨对虾 基因调控
2015/6/2
利用改构的pEGFP-N1-ie1强启动子载体构建含vp28基因的核酸疫苗，通过肌肉注射和饲料添加的形式免疫对虾，分析各实验组相对保护率和免疫基因（Dicer,Argonaute,STAT和Lyzome）表达，研究构建vp28重组核酸疫苗对凡纳滨对虾的保护效果。RT PCR结果表明，注射和口服vp28组均可在对虾鳃组织中检测到vp28基因表达。在注射组中vp28的相对保护率为22.4%，饲料免疫组...
3种DNA提取方法对WSSV检测结果的影响
DNA提取方法 PCR WSSV
2015/6/1
比较了酚 氯仿法、煮沸法、试剂盒法3种基因组DNA提取方法对WSSV DNA提取效率、纯度及病毒检测结果的影响。结果表明，3种方法的DNA提取效率平均值分别为 101.5、372.6、21.5 ng/μl；OD260 /OD280范围分别是 1.979~2.175（平均值为2.070）、1.699~1.932（平均值为1.796）、1.784~2.075（平均值为1.951）；OIE巢式PCR阳性...
分析了克氏原螯虾Procambarus clarkia人工感染白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)后，其血细胞吞噬(Phagocytosis)活性，肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性的变化规律，其目的是为WSSV感染与螯虾的免疫防御反应等研究提供依据。分析结果显示，随着WSSV感染克氏原螯虾时间的延长，血细胞吞噬活性、肝胰腺酸性磷酸酶(A...
对虾白斑综合征病毒( WSSV) 致病相关基因研究进展
白斑综合征病毒 致病 相关基因
2009/6/17
介绍了最近几年白斑综合征病毒WSSV 致病相关基因的研究进展, 包括病毒囊膜蛋白基因、核衣壳蛋白基因、病毒复制过程的关
键酶基因、细胞因子受体基因、潜伏相关基因和抑制宿主细胞凋亡机制的基因等。
根据基因库中对虾白斑综合征病毒WSSV(AF369029)和传染性皮下及造血器官坏死病毒IHHNV(AF218226)基因序列，设计了WSSV和IHHNV的两对特异性引物和两条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。对反应条件和试剂浓度进行优化，建立了能够同时检测WSSV和IHHNV的二重实时荧光PCR方法。该方法特异性好，对WSSV和IHHNV的检测敏感性分别达到2和20个模板拷贝数；此外抗干扰能...
通过酶联免疫吸附法（ELISA）测定不同稀释度对虾白斑综合征病毒（WSSV）与已制备的WSSV囊膜蛋白单克隆抗体结合的OD值。利用克氏原螯虾Cambarus proclarkii动物模型，将不同稀释度病毒与单抗1∶1混合孵育2h后，肌肉注射克氏原螯虾（50μl/只），观察记录螯虾的死亡情况。ELISA结果显示，在1×10-3病毒稀释度下两种单抗均足量。在螯虾体内中和实验中，当病毒浓度为1×10-...