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探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)直接靶板微滴生长法(direct-on-target microdroplet growth assay,DOT-MGA)对快速鉴别耐碳青霉烯类肠杆菌(carbapenem-resi...
探讨建立高效液相色谱质谱-串联质谱联合检测(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)技术检测新生儿干血斑甲基丙二酸(methylmalonic acid,MMA)和同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)cut-off值的方法。方法?收集本院分娩的新生儿MS/MS筛查中C3、C3/C2和C3/C0任一指标偏高的正常干血...
建立测定慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia, CML) 患者血浆帕纳替尼浓度的高效液相色谱- 串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于帕纳替尼血药浓度日常监测,为帕纳替尼合理使用提供实验室依据。方法 采用含内标(帕纳替尼-d8)的甲醇对患者血浆进行沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇相(0.1% 甲酸)和水相(0...
对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定百日咳鲍特菌谱库进行扩展。 方法:采用Microflex LT软件,用经全基因组测序确认的9株百日咳鲍特菌和1株副百日咳鲍特菌构建蛋白质指纹谱库,对布鲁克数据库进行扩展。对标准菌株ATCC 29213、ATCC 25922、ATCC 700603、ATCC 27853进行MALDI-TOF MS鉴定,评价扩展库的准确性。选取6株...
建立检测类风湿关节炎患者红细胞中多聚谷氨酸化甲氨蝶呤(methotrexate polyglutamates,MTXPGs)浓度的HPLC-MS/MS法。方法 采用间接测定法,以同位素甲氨蝶呤-d3为内标,分别测定游离甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)和总MTX(MTX+MTXPGs),从而计算出红细胞中MTXPGs浓度。为测定游离MTX,全血样品经反复冻融、甲醇沉淀蛋白后,经LC-MS...
研究D-半乳糖诱导的衰老大鼠肾细胞(NRK)内源性代谢物的变化,寻找与衰老有关的代谢生物标志物,探讨二至丸对衰老模型的调节作用及其抗衰老的可能机制。方法 采用D-半乳糖复制NRK细胞衰老模型,借助气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,对各组细胞样本进行测定,采用Kruskal-Wallis非参数检验及Dunn's多重比较进行单变量统计分析来筛选差异性代谢物。
探究基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)在HBV相关肝癌蛋白质组学中的应用价值。选取2018年1月—2018年6月在我院就诊的HBV相关肝癌患者30例,健康自愿者25例,弱阳离子磁珠捕获技术血清蛋白,运用MALDI-T...
利用代谢组学技术探讨人巨细胞病毒(HCMV)肝炎湿热内蕴证的证候实质。方法 收集20例HCMV肝炎湿热内蕴证的患儿和20例正常对照组婴儿。采用超高效液相-线性离子阱/静电场轨道阱质谱联用技术对这些受试者的血浆及尿液样本进行代谢组学研究。通过正交偏最小二乘法对这些代谢数据进行分析,同时采用受试者工作曲线评价潜在生物标志物的特异性和敏感性。
建立超高效液相色谱 串联质谱法(UPLC MS)同时测定蒙药材蓝刺头中绿原酸、1,5 二咖啡酰奎宁酸、3,5 二咖啡酰奎宁酸、4,5 二咖啡酰奎宁酸、芹菜素和芹菜素 7 O 葡萄糖苷含量的方法。方法:样品分析采用Agilent 6430液质联用仪;色谱柱为Agilent ZORBAX RRHD Ecilipse Plus C18;流动相为01%甲酸水溶液 甲醇,梯度洗脱;离子源为电喷雾电离源(E...
研究代谢综合征(metabolic syndrome,MS)对冠脉侧支形成的影响,探讨其可能机制。方法 2010年1月至2014年1月间,460位患者符合入选条件,组成研究人群。根据诊断标准筛选MS病例进行分组,分析冠心病患者的MS流行病学特点,通过冠脉造影评估侧支血流及血管病变严重程度,测定胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator ...
近年来,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)作为一种新的质谱技术成功检测出许多与疾病相关的新型生物标志物,尤其在肿瘤的诊治方面,MALDI-TOF-MS可以快速检测出癌症患者体内特异的蛋白表达、辅助制定患者特异性的疗法、预...
观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。 方法: 以MS-275(0、5、10、20 μmol/L)作用于人宫颈癌SiHa细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡,Western blotting法检测细胞内乙酰化组蛋白H4(acetylhistone4,Ac-H4)水平,RT-PCR检测p21和p53 mRNA的表达...
建立测定人血浆中盐酸右美托咪定浓度的方法。方法:血浆样品用乙酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)萃取浓缩后进样。采用液-质联用(LC-MS/MS)法进样测定,以替米沙坦为内标,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18,流动相为甲醇-1%甲酸水(75∶25,V/V);采用电喷雾离子源(ESI),以多反应离子检测(MRM)方式进行检测。右美托咪定和内标检测离子对的m/z分别为201.1/95.1...
通过血浆磷脂代谢分析,发现、判别肾移植急性排斥反应的血浆生物标志物以辅助临床诊断。 方法 选取2009年至2010年在本院行肾移植的患者33例,为术前组,术后按照是否发生急性排斥反应分为急性排斥组(n=14)和非急性排斥组(n=19),利用超高分辨率液相色谱-四级杆-飞行时间质谱串联(UPLC- qTOF-MS)分析技术建立肾移植急性排斥反应患者血浆代谢指纹图谱。采用偏最小二乘法-判别分析(...
建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS),以磺胺甲噁唑(SMZ)为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS PFP柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),流动相为0.1%甲酸的5 mmol·L-1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液(0...

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