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中国科学院动物研究所专利：沙眼衣原体, 解脲脲原体, 淋病奈瑟菌的单管同步三重PCR检测方法及所使用的引物
中国科学院动物研究所 专利 沙眼衣原体 解脲脲原体 淋病奈瑟菌 PCR检测
2024/6/14
本发明根据沙眼衣原体(CT)，解脲脲原体(UU)，淋病奈瑟菌(NG)相关DNA序列、设计了3对相应的特异聚合酶链式反应(PCR)寡聚核苷酸。可在临床样品中分别扩增出CT、UU、NG相应序列的205碱基对(bp)、439bp和672bp的DNA片段，三个扩增片段大小间相差230bp左右，在普通琼脂糖凝胶电泳中有很高的分辨率。本发明用单管同步检测CT、UU、NG三种病原体的现有PCR方法代替只能检测一...
采用2种重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将5种立克次体目的基因片段进行融合，同时对2种方法进行比较。方法?采用一步法及两步法融合基因技术，对5种立克次体融合基因进行构建，并优化一步法中重叠引物浓度以及两步法中各靶基因产物加入量，以提高2种方法的融合效率。
评价总胆红素、三酰甘油、血红蛋白和总免疫球蛋白G（IgG）对荧光定量PCR测定HBV DNA的干扰。 方法：参照EP7-A2方案对HBV DNA测定进行干扰评价试验。采用配对差异试验验证厂家的干扰声明，对不符合声明的干扰物通过剂量效应试验分析干扰物浓度与干扰程度之间的关系。
PCR-RFLP在VVC相关念珠菌菌种鉴定中的应用
限制性片段长度多态性聚合酶链反应 念珠菌 方法学评价
2021/3/26
用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)技术快速准确鉴定外阴阴道念珠菌病(VVC)相关念珠菌菌种，并对科玛嘉显色培养法、Vitek 2 YST鉴定卡和PCR-RFLP 3种方法鉴定念珠菌菌种的效果进行方法学评价。 方法：收集贵阳市妇幼保健院VVC患者感...
上海交通大学医学院医学检验学课件 PCR-SSCP
上海交通大学医学院 医学检验学 课件 PCR-SSCP
2018/12/27
上海交通大学医学院医学检验学课件 PCR-SSCP。
基孔肯雅病毒荧光定量PCR检测方法的建立
荧光定量PCR 基孔肯雅病毒 检测 交叉反应
2014/6/19
建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,检测基孔肯雅病毒。方法 通过序列比对挑选出基孔肯雅病毒基因组中高度保守的序列,在此序列上设计引物及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果 经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达21拷贝/μl,通过检测与传播媒介相似的流行性乙型脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应。结论 该方法的建立在基...
引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide, DPO)设计, 建立基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法。方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S-23S rRNA基因为靶基因, 设计一对DPO引物, 经过PCR反应体系优化, 建立小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法。测定了检测灵敏度, 以常规PCR方...
GI和GII型诺如病毒双重荧光RT-PCR法检测
Allglo探针 GI和GII型 诺如病毒 快速检测
2014/7/23
建立应用Allglo探针同时检测GI和GII型诺如病毒的双重荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法。方法 设计针对GI和GII型诺如病毒开放阅读框架ORF1及ORF2为目的基因的引物和Allglo探针,优化最佳反应条件,建立一步法荧光RT-PCR快速检测反应体系;对该方法的特异性、抗干扰性、灵敏度进行评估,对96份临床粪便标本进行检测、测序分析。结果 该方法特异性强,与轮状病毒、扎如病毒、星...
基孔肯雅病毒的纳米金实时荧光PCR方法的建立
纳米金 实时荧光PCR 基孔肯雅病毒
2014/6/18
建立一种检测基孔肯雅病毒纳米金实时荧光定量PCR的方法。方法 以课题组建立的普通实时荧光PCR方法为基础,在PCR体系中添加不同大小粒径的纳米金进行体系优化,评价优化后的体系。结果 添加纳米金的实时荧光PCR较不添加的扩增效率高;优化后的纳米金实时荧光PCR产物的Ct值与模板稀释浓度存在良好的线性关系,回归方程:y＝-3.31x+41.78,R2＝0.9997,PCR扩增效率为99.5%。结论 纳...
建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法。方法 从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测。结果 确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应...
KPC型碳青霉烯酶基因荧光定量PCR快速鉴定
荧光定量PCR KPC型碳青霉烯酶基因 鉴定
2014/7/17
建立一种准确地鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)基因的方法。方法 比对11种KPC型碳青霉烯酶基因,在保守区设计引物和探针,优化PCR反应体系,评价特异性、灵敏度和重复性,对样本分离株进行检测,通过测序、药敏实验等验证该方法的正确性。结果 该方法可准确、特异地鉴定KPC型碳青霉烯酶基因,其他不携带该基因的菌株均无阳性结果;阳性质粒、纯培养细菌和模拟样本的灵敏度分别为10 copies/μL、10...