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恶性疟原虫对咯萘啶敏感性的体外微量测试方法
恶性疟原虫 咯萘啶 敏感性 体外微量测试法
2009/2/25
目的 研究并建立恶性疟原虫对咯萘啶敏感性的体外微量测试方法。 方法 研制咯萘啶涂药板和便于现场使用的培养基，先在实验室用体外连续培养的恶性疟原虫（FCC1/HN）测试，证明咯萘啶涂药板和培养基的效果稳定可靠后，在疟疾流行高峰季节赴海南省及云南省现场，取恶性疟现症病人血样，测试恶性疟原虫对咯萘啶的敏感性，并设体内四周法为对照。 结果 研制的咯萘啶涂药板及现场用的培养基效果稳定，咯萘啶涂药板4 ...
恶性疟原虫对氯喹抗性及其逆转剂的研究进展
恶性疟原虫 氯喹抗性 抗性逆转剂
2009/2/25
恶性疟原虫对氯喹抗性的出现和广泛传播迫使人类调整治疗疟疾的用药策略并寻找更加有效的新型抗疟药。然而，在一些贫困的疟疾流行区，氯喹仍被用于治疗恶性疟。了解氯喹抗性机制、探索逆转其抗性的方法，将使氯喹这一价廉高效的抗疟药继续发挥作用。抗性逆转剂的研究和发展为上述目标提供了线索，当与氯喹合用时它能够部分恢复氯喹对氯喹抗性株的作用。为此，本文对恶性疟原虫氯喹抗性机制及其逆转剂的研究进展作一综述。
恶性疟原虫二氢叶酸还原酶基因的突变
恶性疟原虫 二氢叶酸还原酶(dhfr)基因 基因突变
2009/2/25
目的 探测云南恶性疟原虫二氢叶酸还原酶基因 (dhfr)与乙胺嘧啶和双氯胍抗性有关的基因位点突变的情况。方法 应用特异性套式PCR和限制性酶切片段长度分析 (RFPS)检测采自现场的干滤纸血样。结果 检测到恶性疟原虫dhfr基因内 16 ,5 1,10 8和 16 4位氨基酸有不同程度的突变 ,以Asn 10 8和Ile 5 1为甚 ,出现频率分别为 94.1%和 90 .1%。野生型 (3D7型...
恶性疟原虫复合抗原重组真核表达质粒的构建与表达
恶性疟原虫 DNA疫苗 抗原 基因
2009/2/25
目的 构建编码恶性疟原虫不同发育期抗原表位的复合抗原基因HGFSP的重组真核表达质粒。 方法 将HGFSP亚克隆于真核表达载体pcDNA3构建重组真核表达质粒 pc HGFSP ;琼脂糖凝胶电泳和限制性内切酶分析鉴定 ;脂质体介导转染HepG2细胞。取经G418筛选的阳性细胞克隆进行免疫学鉴定。 结果 酶切及电泳鉴定证实pc HGFSP含有HGFSP。间接免疫荧光试验 (IFAT)、SDS PA...
恶性疟原虫富组氨酸蛋白2重组蛋白与真核表达质粒免疫特性的比较
恶性疟原虫 富组氨酸蛋白2 疫苗 免疫应答
2009/2/25
目的 探讨以恶性疟原虫富组氨酸蛋白 2 (PfHRP2 )为基础的不同形式的侯选疫苗诱导小鼠免疫应答的特性 ,为包含HRP2的恶性疟红内期疫苗的研制提供实验依据。方法 用重组蛋白TP HRP2及真核表达质粒pcDNA3 1(- ) HRP2免疫BALB c小鼠 ,对抗体应答的动力学及特异性进行分析 ,取脾细胞进行体外增殖实验 ,用免疫血清进行P f.体外生长抑制实验。结果 重组蛋白TP HRP2加...
恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1模拟肽的筛选及鉴定
恶性疟原虫 红细胞膜表面蛋白1 噬菌体随机肽库 表位模拟肽
2009/2/25
目的 筛选恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1（PfEMP?鄄1）的噬菌体表位模拟肽。 方法 细胞间粘附分子ICAM-1模拟12肽（KLYLIAEGSVAA）能模拟ICAM-1分子与疟原虫感染红细胞结合的功能，以展示该短肽的噬菌体为靶，采用差减筛选法（subtraction method）对噬菌体环7肽库进行3轮筛选，通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与ICAM-1之间的结合特性。对阳...
恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化和鉴定
恶性疟原虫 谷氨酸脱氢酶 大肠埃希菌 可溶性表达
2009/2/25
目的 在大肠埃希菌 (E .coli)中尝试非融合蛋白技术可溶性表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶 (GDH) ,以获得具有相对完整空间表位的重组非融合GDH。 方法 将恶性疟原虫GDH基因克隆到pET-23 (a)表达载体中 ,转化E .coli BL21菌株 ,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达 ,菌体反复冻融后 ,通过十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)分析表达产物的存在形式 ...
恶性疟原虫海南分离株裂殖子表面蛋白1基因的分型研究
恶性疟原虫 裂殖体表面蛋白1 基因分型 序列分析
2009/2/25
目的 了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1(PfMSP1)等位基因型的分型特征。方法 采用套式PCR方法 ,用几对PfMSP1特异引物扩增疟原虫虫株PfMSP1基因第 2区与第 3区部分片段 ,并对等位基因型代表株的基因片段进行序列分析。结果 39份血样中有 36份恶性疟患者共扩增出 44个PfMSP1基因片段 ,以MAD2 0型为主导型 (占 75 % ) ,K1型为次要型 ,未检出RO33...
恶性疟原虫红细胞膜蛋白1（PfEMP1）与var基因家族
恶性疟原虫 红细胞膜蛋白1(PfEMP1) var 基因家族
2009/2/25
恶性疟原虫红细胞膜蛋白1（PfEMP1）与var基因家族。
目的 检测由毕氏酵母表达的恶性疟原虫融合蛋白(Plasmodiumfalciparumchimericprotein)PfCP-2.9的自由巯基。方法使用反向高压液相层析和Ellman氏反应进行检测。用反向高压液相,检测了3种样本,PfCP-2.9、PfCP-2.9经二硫苏糖醇还原、PfCP-2.9经吲哚乙酸烷基化。结果两种检测方法均表明PfCP-2.9不含任何自由流基。结论由毕氏酵母表达的PfC...
恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9的单克隆抗体制备及功能分析
恶性疟原虫 疟疾疫苗 单克隆抗体 免疫显性表位
2009/2/25
目的 制备恶性疟原虫（FCC1/HN株）融合抗原PfCP-2.9的单克隆抗体，分析其生物学特性及功能。 方法 用PfCP-2.9免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞及SP2/0骨髓瘤细胞在聚乙二醇（PEG1500）作用下进行融合，制备单克隆抗体，并分析其特性。 结果 获得1株能分泌抗PfCP-2.9的小鼠杂交瘤细胞株单克隆抗体F12D，经免疫球蛋白类型和亚类鉴定为IgG1。ELISA和蛋白质印迹法（W...
杜氏利什曼原虫平原和荒漠疫区分离株LACK基因克隆及序列分析
利什曼原虫 LACK 克隆 序列分析
2009/2/25
目的 测定我国平原疫区和荒漠疫区杜氏利什曼原虫分离株活性蛋白激酶 C受体同源物 (L ACK)基因序列 ,并与山丘疫区分离株及国外利什曼原虫分离株进行比较。 方法 应用 RT- PCR扩增 L ACK基因 ,将其克隆入p UC18载体后用双脱氧链末端终止法测序 ,并与 Gen Bank中相关数据进行比较。 结果 用 RT- PCR成功扩增出约95 0 bp的 L ACK基因片段 ,测序结果表明其片...
杜氏利什曼原虫四川分离株无鞭毛体蛋白基因的克隆及真核表达
杜氏利什曼原虫 无鞭毛体蛋白 基因克隆 表达
2009/2/25
目的 克隆、真核表达杜氏利什曼原虫四川株的无鞭毛体蛋白（amastin）编码基因。 方法 PCR扩增杜氏利什曼原虫四川汶川人株L.d.SC10H2与四川南坪犬株L.d.SC7的无鞭毛体蛋白基因，将该基因导入pcDNA3.1（+），构建真核表达重组质粒，转染NIH3T3细胞，采用免疫荧光法鉴定重组质粒的瞬时表达；RT-PCR和Western blotting鉴定稳定表达。 结果 2株杜氏利什曼...
对恶性疟原虫FCC1/HN分离株AMA-1序列变异的见解
恶性疟原虫 FCC1/HN分离株 AMA-1序列 变异
2009/2/25
对恶性疟原虫FCC1/HN分离株AMA-1序列变异的见解。