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中国农业科学院棉花研究所专利：一种亚洲棉原生质体的分离与外源基因转化的方法
亚洲棉 原生质体分离 外源基因 转化方法
2024/5/13
本发明公开了一种亚洲棉原生质体分离与外源基因转化的方法。该方法包括亚洲棉种子萌发、酶解分离原生质体、离心收集原生质体、培养、外源基因转化及显微观察鉴定等步骤。本发明黑暗环境中生长的叶片所分离的原生质体浓度符合实验需求且完整度高，可得到完整的转化成功的原生质体。因此本发明得出的利用黑暗环境培养的叶片分离原生质体方法，更好地解决了亚洲棉原生质体分离及外源基因转化的难题。亚洲棉原生质体分离及外源基因成功...
中国农业科学院棉花研究所专利：一种棉花原生质体制备方法
棉花 原生质体 制备方法
2024/4/11
本发明提供了一种棉花原生质体制备方法，属于植物细胞生物学技术领域，包括如下步骤：(1)取棉花花朵，用刀片将花瓣切成细丝；(2)将细丝置于6孔细胞培养板中，每孔放一个花瓣的量，每孔加入5-8ml酶解液，之后酶解；(3)酶解结束后对酶解反应液进行过滤；(4)取滤液加入离心管，第一次离心；(5)用枪头吸去离心管内的上清，向原生质体沉淀中加入第一W5溶液，第二次离心，再次用枪头吸去上清，然后再加入第二W5...
近日，中南林业科技大学、岳麓山实验室刘高强课题组在分析化学领域权威期刊Analytical Chemistry（中科院一区Top，IF：8.008）发表了题为“Non-Destructive and Quantitative Analysis of Cell Wall Regeneration in Medicinal Macrofungus Ganoderma lingzhi by Membra...
中国科学院植物研究所科研人员建立了一种适用单细胞转录组测序的原生质体提取方法（图）
单细胞转录 原生质体
2022/11/11
单细胞转录组测序（Single-cell RNA sequencing）是2022年来兴起的在单细胞水平进行测序的新技术，可以在单细胞水平上重建组织的转录地形图、鉴定不同细胞类型和重建细胞谱系的发育轨迹，对深入理解细胞分化和相关调控网络有着极大的促进作用。从植物组织中释放高质量的原生质体是单细胞转录组测序的前提。然而，由于植物细胞通常由致密的细胞壁所包裹，并且细胞壁在物种间以及不同组织间差异巨大，...
单细胞转录组测序（Single-cell RNA sequencing）是近年来兴起的在单细胞水平进行测序的新技术，可以在单细胞水平上重建组织的转录地形图、鉴定不同细胞类型和重建细胞谱系的发育轨迹，对深入理解细胞分化和相关调控网络有着极大的促进作用。从植物组织中释放高质量的原生质体是单细胞转录组测序的前提。然而，由于植物细胞通常由致密的细胞壁所包裹，并且细胞壁在物种间以及不同组织间差异巨大，使得单...
蚌埠医学院蛋白质与酶工程课件第6章 酶、细胞、原生质体固定化
蚌埠医学院 蛋白质与酶工程 课件 第6章 酶、细胞、原生质体固定化
2017/11/14
蚌埠医学院蛋白质与酶工程课件第6章 酶、细胞、原生质体固定化。
雷公藤悬浮细胞原生质体的制备及瞬时转化体系的建立
原生质体 悬浮细胞 瞬时转化 雷公藤
2018/6/19
为探索药用植物雷公藤(Tripterygium wilfordii)悬浮细胞原生质体提取的最优条件, 并建立雷公藤原生质体瞬时转化体系, 以雷公藤悬浮细胞为材料, 对酶解液配比、酶解时间、甘露醇浓度及处理转速进行考察。用PEG介导的瞬时转化法将外源基因转化到雷公藤原生质体中。结果表明, 以雷公藤悬浮细胞为材料提取原生质体的最佳条件是酶液配比为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.5%离析酶, 甘露...
非洲菊原生质体制备及瞬时转化系统的建立
非洲菊 原生质体制备 瞬时表达 蛋白互作
2018/6/20
非洲菊(Gerbera hybrida)已成为研究复杂花序进化与发育的模式植物。以非洲菊无菌组培苗叶片为材料, 分析不同浓度纤维素酶及离析酶配比对非洲菊原生质体提取效率的影响, 建立了稳定、高效的非洲菊原生质体提取与瞬时转化体系。结果表明, 以2.0%纤维素酶+0.3%离析酶组合, 在0.4 mol·L–1甘露醇溶液中, 酶解4小时, 酶解温度为25°C, 得到产量高达2.2×107个·g–1 F...
棉花保卫细胞原生质体的有效分离与活性鉴定
棉花 保卫细胞 原生质体 K+电流
2018/12/26
模式植物拟南芥保卫细胞原生质体的分离技术已得到应用, 然而如何有效分离和纯化棉花保卫细胞原生质体, 已成为棉花气孔运动调控机理研究的限制因素。本文探索了一种棉花保卫细胞原生质体分离和活性鉴定的方法。我们选取生长2~3周的棉花幼叶下表皮, 利用1.3%纤维素酶和0.03%果胶酶进行一步酶解约1.5 h, 先低速15×g离心5 min, 再高速105×g离心10 min分离, 所获得保卫细胞原生质体的...
灭活原生质体融合技术选育苏云金杆菌新菌种：原生质体融合条件的研究
苏云金杆菌 原生质体融合 灭活 微生物杀虫剂
2009/11/9
利用双灭活原生质体融合技术获得了苏云金杆菌新菌株。着重对原生质体制备，再生、恶劣活及融合的实验条件进行了报道。灭活原生质体融合技术选育苏云金杆菌新菌种.
Υ-亚麻酸菌株少根根霉原生质体形成与再生
原生质体 少根根霉 7一亚麻酸；形成 再生
2009/10/29
用6 mg／mL纤维素酶+3 mg／mL蜗牛酶+1 mg／mL溶茵酶作为混合酶酶解28℃ 培养26 h的茵丝。以含0．6 mol／L NH4C1磷酸缓冲液(pH6．0)，+0．02 mol／L MgSO4·7H20+0．4 mmol／L CaC12作为渗透压稳定剂，酶解前以0．3％ 巯基乙醇处理35 min，从少根根霉的茵丝中获得了大量的原生质体。同时对茵丝的培养时间、渗透压稳定剂、酶解系统和酶解...
从自然界筛选出一株降解木质素高的白腐真菌L1，对其原生质体的形成和再生进行了研究。在OS培养基中生长的茵丝体，原生质体数量较高。在液体培养条件下，于OS培养基中培养60 h的茵丝体，用0．3%-β巯基乙醇与酶液同时处理茵丝体，采用pH5．0的混合酶(蜗牛酶：纤维素酶：溶茵酶的最佳浓度比为5：4：1)；在30℃酶解4 h；用0．4 mol／L NH4Cl，10 mmol／L MgSO4作渗透压稳定剂...
尖顶羊肚菌原生质体的分离及再生
尖顶羊肚菌 原生质体 菌丝体的再生
2009/4/15
培养在液体培养基中的尖顶肚菌(Morchella conica Pers)菌丝体可以分离出大量的原生质体。在组合的2号酶液中，在30℃下经4.5小时处理的产量最高(为6.2×106个原生质体/100mg·ml)。此法分离得的原生质体再生力很强，液体培养18／小时即可再生成菌丝。再生的细胞进行植板培养后形成了菌丝体，并获得了从原生质体再生的菌株。
美味牛肝菌原生质体再生菌丝的新方式
美味牛肝菌 原生质体再生
2009/4/8
食用菌原生质体的分离并培养成再生菌丝是研究食用菌细胞融合和基因转移的一项技术。有的文章[1]已综述了有多种食用菌的原生质体已被分离，只有一些种的原生质体被培养成再生菌丝体，美味牛肝菌的原生质体虽已被分离但未培养成再生菌丝。食用菌原生质体可以通过不同方式再生菌丝体。Peberdy[2]曾论述过有的真菌是由原生质体膨大生长成形态不正常的类似出芽链的细胞而再生菌丝的较为特殊的方式。本文报道美味牛肝菌原生...