搜索结果: 1-12 共查到“轻工技术与工程 PCR”相关记录12条 . 查询时间(0.154 秒)
多重实时荧光定量PCR分析转基因烟草外源基因拷贝数
转基因烟草 多重实时荧光定量PCR 外源基因 拷贝数
2018/6/6
[目的]采用多重实时荧光定量PCR方法在一个反应内同时检测转基因烟草中插入外源基因35S、NOS、NPT Ⅱ的拷贝数。[方法]将转基因阳性参照烟草基因组DNA经梯度稀释，通过多重荧光定量PCR反应同时获得烟草内源参照基因NR、外源基因35S、NOS、NPT Ⅱ的相关性标准曲线方程，将待测株系外源基因的Ct值代入标准曲线方程后估算其拷贝数。[结果]获得了上述4个基因的标准曲线，其R2均接近于1，相关...
2014年12月24日，国家知识产权局公开一件由云南省烟草农业科学研究院申请的发明专利：一种检测烟草土传真菌病原物的PCR引物及应用与方法。所述的检测烟草土传真菌病原物的PCR引物由烟草立枯病菌引物、黑胫病菌引物、根黑腐病菌引物和猝倒病菌引物组成；应用为所述的检测烟草土传真菌病原物的PCR引物在同时检测烟草4种土传真菌病原物中的应用，所述的4种土传真菌为烟草立枯病菌、黑胫病菌、根黑腐病菌和猝倒病菌...
一种快速检测转基因烤后烟叶的四重PCR引物及方法发明专利获公开
转基因烤后烟叶 四重PCR引物 发明专利
2014/11/25
2014年11月19日，国家知识产权局公开一件由贵州省烟草科学研究院申请的发明专利：一种快速检测转基因烤后烟叶的四重PCR引物及方法。该方法所涉及的引物由烟草内源基因元件NR(硝酸还原酶基因)及外源基因元件(包括35S启动子、NOS终止子、NPTII筛选标记基因)组成。通过四重PCR扩增，在一次PCR反应中可同时检测NR基因及3个外源基因，检测方法包括以下步骤：四对引物稀释成等摩尔浓度后按1:1:...
河南省烟草根结线虫种类的PCR鉴定与种群分析
河南 根结线虫 PCR分子检测 会阴花纹鉴定
2014/7/16
根结线虫病是河南烟草生产上的重要病害，了解根结线虫病病原种类是培育和选用抗病品种的基础。为了弄清河南省烟田根结线虫种群分布及比例，2012年采集了河南省烟叶主产区的8个县共12份烟草根结线虫样本。通过对线虫样本的PCR分子检测和雌成虫会阴花纹的形态鉴定，结果表明，检出烟草根结线虫4种，其中南方根结线虫（Meloidogyne incognita）检出率为55.83% ，花生根结线虫（Meloido...
烟草抗PVYN突变株SN01的SRAP-PCR反应体系的建立与优化
烟草 抗PVYN突变株 SRAP-PCR 体系优化
2015/8/31
采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素（dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物和DNA）进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明，在20 μL的反应体系中，各因素的最佳加入量分别是：dNTPs（2.5 mmol/L）3.2 μL、Mg2+（25 mmol/L）1.6 μL、Taq DNA聚合酶（2.5 U/μL）0.16 μL、...
烟草中TMV、CMV和PVY多重RT-PCR检测体系的建立与应用
烟草 多重RT-PCR 病毒检测 应用
2010/12/6
利用DNAMAN软件对GenBank数据库中已登录的烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus, TMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV）和马铃薯Y病毒（Potato virus Y, PVY）全基因组序列进行序列比对，选择最保守的区域，进行相应病毒的引物设计，建立了多重RT-PCR检测烟草中TMV、CMV和PVY的技术体系。对3条扩增片段进行回收...
实时荧光RT-PCR检测By33蛋白抑制TMV复制的作用
实时荧光定量PCR 活性蛋白 复制
2010/12/6
供试烟草NC89接种TMV后6 h，接种叶悬浮于By33无菌活性蛋白、无菌水中48 h，实时荧光RT-PCR检测病毒RNA复制量，结果显示：悬浮于By33蛋白50、100倍液的处理，病毒RNA复制量分别为0.302434和0.411478 ，低于悬浮于无菌水处理（0.438963）。悬浮叶研磨接种三生烟，悬浮于By33蛋白50、100倍液处理与悬浮于无菌水处理比，枯斑抑制率分别为96.97和97....
马铃薯Y 病毒是近年来危害烟草生产的重要病毒之一，严重影响烟草的产量与品质。本研究利用DNAMAN 软件对GenBank 数据库中已登录的马铃薯Y 病毒 (Potato virus Y, PVY) 全基因组序列进行序列比对，设计引物，以烟草肌动蛋白基因为内参，建立了烟草PVY 的实时定量检测体系。获得的real-time PCR 扩增基线平整，指数扩增明显，斜率大；稳定性和重现性好，变异系数小；循...
烟草Nt-syr1基因实时荧光定量PCR检测方法
实时荧光定量PCR 烟草 Nt-syr1 基因表达
2009/6/17
根据烟草Nt-syr1基因mRNA序列设计特异引物，建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR反应体系，对烟株打顶后叶片Nt-syr1基因进行了mRNA转录水平上的定量分析，为从分子生物学水平上研究烤烟钾素营养调控机理提供新的技术手段。该方法简单实用，获得的荧光定量PCR扩增曲线基线平整，指数区扩增明显，斜率大；稳定性和重现性好，变异系数小；循环阈值Ct与PCR起始模板量的对数值之间存在良好...
利用电镜负染色法及Tospovirus病毒不同血清组DAS-ELISA检测试剂盒，从具有典型叶脉间斑块状褪绿、黄化及褐色坏死症状的白肋烟病株中检测到Tospovirus病毒；利用根据Tospovirus病毒N-gene中部分片段保守序列设计的引物，建立了RT-PCR特异检测Tospovirus病毒的方法。